【科普】近期多種呼吸道病原體感染共同流行，如何選用合適的病原體檢測(cè)方法？

蔡勉珊普寧市人民醫(yī)院

呼吸道感染性疾病在臨床中很常見，而冬春季節(jié)更是呼吸道感染的高發(fā)季節(jié)。呼吸道感染分為上呼吸道感染和下呼吸道感染。2019 年世界衛(wèi)生組織( World Health Organization，WHO) 公布的全球主要死亡原因中就包括了呼吸道感染，下呼吸道感染仍然是世界上病死率最高的感染性疾病之一，排在主要死亡原因的第四位。兒童是呼吸道感染的易感人群，近期呼吸道感染病原體在兒童中排名前三位的為流感、腺病毒、呼吸道合胞病毒，第四位為肺炎支原體，呈現(xiàn)出多種病原體共同流行的態(tài)勢(shì)。

不同類型的呼吸道感染性疾病的區(qū)別

不同呼吸道病原體感染引起的臨床癥狀、體征相似，因此，臨床醫(yī)師僅僅依靠臨床癥狀、體征，很難對(duì)疾病作出準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷。在沒有明確的病原微生物學(xué)診斷的情況下，治療上容易出現(xiàn)廣譜抗菌藥物和糖皮質(zhì)激素類藥物的濫用，或者延誤治療。

病原體的快速檢測(cè)和精準(zhǔn)診斷是其有效治療的前提。在多種呼吸道病原體共同流行的高發(fā)季節(jié)，感染過一種呼吸道傳染病的人還有可能感染其他種類，出現(xiàn)混合感染、先后感染。因此，一次對(duì)多種病原體同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，可以極大地提升診斷效率，輔助臨床醫(yī)生進(jìn)行鑒別診斷以及識(shí)別混合感染的風(fēng)險(xiǎn)。傳統(tǒng)微生物學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)對(duì)呼吸道病原體檢測(cè)的靈敏度偏低，而核酸檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展和臨床應(yīng)用大幅度提高了呼吸道病原體的診斷能力。多重核酸檢測(cè)方法可以在同一份標(biāo)本中檢測(cè)出多種病原體，提示存在混合感染的情況，通過病原體相對(duì)載量高低，可以判斷哪種病原體是主要病原體?；蛘咄ㄟ^聯(lián)合不同檢測(cè)方法，確定致病病原體。

不同檢測(cè)方法的比較

例如：1.呼吸道13種病原體多重檢測(cè)方法：是用PCR毛細(xì)電泳片段分析法，可在一份標(biāo)本中檢測(cè)的病原體包括：甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1(2009)、季節(jié)性H3N2病毒、乙型流感病毒、偏肺病毒、腺病毒、博卡病毒、肺炎支原體、鼻病毒、冠狀病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、衣原體。標(biāo)本：①痰液：深部咳痰，≥1mL；②咽拭子：一次性植絨拭子采集，裝入3ml細(xì)胞保存液。

2. 六項(xiàng)呼吸道病原菌核酸檢測(cè)項(xiàng)目：是利用熒光PCR檢測(cè)方法，可以同時(shí)檢測(cè)六種呼吸道病原菌，包括：肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、軍團(tuán)菌。標(biāo)本：痰液，肺泡灌洗液，胸腔積液。

3.肺炎支原體核酸檢測(cè)：是利用熒光PCR檢測(cè)方法檢測(cè)肺炎支原體DNA或RNA。標(biāo)本：咽拭子，痰液，肺泡灌洗液，胸腔積液。肺炎支原體核酸檢測(cè)非常靈敏，且特異性高，發(fā)病初期，選擇核酸檢測(cè)；肺炎支原體抗體IgM一般在感染后4~6天才能產(chǎn)生，3周左右達(dá)到高峰，持續(xù)存在2~4個(gè)月甚至更長(zhǎng)時(shí)間，所以發(fā)病初期可能檢測(cè)不到，發(fā)病一周以上，可以選擇抗體檢測(cè)，或者兩種結(jié)合檢測(cè)。

4.mNGS應(yīng)用高通量測(cè)序：無偏倚性提取標(biāo)本中全部的核酸，通過生物信息分析，獲得疑似致病微生物的種屬信息。具有準(zhǔn)確性和可靠性高、可提供大量的生物信息、對(duì)未知病原確認(rèn)快、周轉(zhuǎn)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。因而在急危重癥、疑難及混合感染診斷方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)。但因成本高，不推薦作為輕癥感染性疾病的一線檢測(cè)。

通過病史、臨床表現(xiàn)，選擇合適的病原體檢測(cè)方法，結(jié)合血常規(guī)等常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目及影像學(xué)檢查等方法，臨床醫(yī)生可以根據(jù)不同病原體選擇合適的抗菌藥物或抗病毒藥物，減少廣譜抗菌藥物的濫用，促進(jìn)疾病的恢復(fù)，減輕病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

參考文獻(xiàn)：

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[3]陳舒影,余方友.呼吸道感染病原體檢測(cè)技術(shù)與發(fā)展趨勢(shì)[J].中國臨床新醫(yī)學(xué),2022,15(10):894-899.

[4]劉靜,閆莉莉,趙淑賢等.宏基因二代測(cè)序在肺部感染病原菌檢測(cè)的應(yīng)用[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2023,58(06):1046-1050.DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.06.029.

供稿：兒科二區(qū) 蔡勉珊

編輯：普寧市人民醫(yī)院辦公室

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